Zadanie 4.6
| Tytuł projektu: | Optymalizacja metod ukierunkowanej mutagenezy roślin w oparciu o technologię prime editing. |
| Kierownik projektu: | dr S. Gasparis |
Szczegółowy opis zakresu rzeczowego zadań w 2025r.:
Cel zadania: Opracowanie wydajnego, wszechstronnego narzędzia edytowania genomu roślin opartego na nowoczesnej technice prime editing. Zaprojektowane narzędzie w postaci wektorów ekspresyjnych do transformacji genetycznej zostanie użyte do edytowania wybranych genów w roślinach jednoliściennych.
Opis zadania:
- Opracowanie nowych wektorów ekspresyjnych zawierających komponenty systemu prime editing dla roślin jednoliściennych. Przygotowane zostaną dwie wersje wektorów w celu oceny efektywności wprowadzonych modyfikacji na poziomie odwrotnej transkryptazy i pegRNA, mających na celu zwiększenie wydajności edytowania. Wektory te zostaną użyte do transformacji genetycznej niedojrzałych zarodków jęczmienia.
- Wykonanie dwóch doświadczeń transformacji genetycznej z wykorzystaniem min. 400 niedojrzałych zarodków jęczmienia (na jedną rundę transformacji) dla każdego wektora do edycji genu metodą Agro-transformacji; łącznie 4 rundy transformacji na min. 1600 zarodków.
- Analiza edycji genów – uzyskanie pokolenia T0, analiza molekularna roślin, genotypowanie. Ze względu na długość cyklu transformacji i regeneracji zarodków jęczmienia, uzyskanie pierwszych, dojrzałych, edytowanych roślin spodziewane jest na początku 2026 roku.